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科研喜讯:呼吸道病原体核酸检测产品助力何贤纪念医院儿科发表有关儿童肺炎支原体感染研究成果

2023-03-28 阅读数:2247

近日,广州番禺何贤纪念医院与广东省妇幼保健院合作研究的一篇研究性论文“Poor accuracy of single serological IgM tests in children with suspected acute Mycoplasma pneumoniae infection in Guangzhou, China”在杂志《Journal of Medical Microbiology》(SCI最新影响因子 3.196)的2023年3月15日刊上得到发表,文章解决了儿科医生经常碰到的一个困惑:呼吸道感染抗体MP-IgM常检出肺炎支原体阳性,但是核酸检测MP为阴性;特别是这样的患儿使用阿奇霉素治疗后还有效,那么是不是MP核酸检测漏检了呢?


儿童肺炎支原体感染 #

肺炎支原体(MP)是引起儿童社区获得性肺炎(CAP)的重要病原体,约占儿童肺炎病例的8%。MP可导致6岁以下儿童的严重肺炎,严重病例甚至需要转移至儿科重症监护病房。临床检测MP的方法包括培养法、血清学法和分子生物学法等。然而,培养法在临床诊断上作用较局限,因其耗时较长且灵敏度较低。血清学和分子生物学检测方法在临床实践中则各有优势。血清学法诊断急性MP感染时,标准的流程是以两次MP-IgM抗体检测(急性期和恢复期)且MP-IgM抗体滴度出现4倍增长时,认为是MP感染的依据。虽然MP-IgM可比MP-IgG早两周产生,在感染急性期更有诊断价值,但MP-IgM也存在检测窗口期,即可能在MP感染后7-10天内才产生,导致单次MP-IgM检测并不能很好地在早期判断患者是否存在MP感染。那么单次MP-IgM检测的准确度到底是多少呢?本研究以肺泡灌洗液中的MP-DNA检测为金标准来判断这个问题。


#MP感染急性期MP-DNA与MP-IgM的检测对比 #

样本于2019年MP感染高发的一年中收集,入组了144位临床症状表现为支气管肺炎并入院治疗的患儿,每名患儿收集到了1份肺泡灌洗液和对应的血清,有的患儿还收集了急性期和恢复期2份血清,故一共收集了144份肺泡灌洗液与199份血清,当中有46名患儿是经过两次(间隔≥2天)血清采集。急性入院时检测MP-IgM滴度≥1:160则判断为单次血清检测的MP感染阳性指标。利用悬浮微珠液相芯片多重呼吸道病原体核酸检测技术对所有的144份肺泡灌洗液样品进行MP-DNA检测,以评估血清MP-IgM抗体检测的可靠性。

研究得出了如下结论:

1、MP-IgM只在急性感染期做单次检测,滴度为阴性、1:160、1:320、>1:320时,肺泡灌洗液中的MP-DNA阳性率分别为58%、55%、57%、62%,说明单次MP-IgM检测为阴性,但实际58%仍然存在MP感染,这可能与抗体产生存在窗口期有关;而单次MP-IgM为阳性,但实际上约一半并没有MP感染,推测是当时我国处于MP感染的高发期,上次感染后产生的MP-IgM在体内残余所导致。同时,MP-IgM单次检测敏感性为85.5%,特异性仅为25.6%,这就是为什么临床经常碰到IgM抗体为阳性,但核酸检测为阴性的原因;

2、在急性期和恢复期都检测了MP-IgM时,以MP-IgM滴度上升4倍作为MP感染的标志,则与肺泡灌洗液MP-DNA检测达到100%一致;

3、有MP感染症状,但肺泡灌洗液中没有检出MP-DNA的患者,悬浮微珠液相芯片多重呼吸道病原体核酸技术检测发现了其他的病原体感染,包括1例鼻病毒、1例呼吸道合胞病毒、2例卡他莫拉菌、5例肺炎链球菌、1例流感嗜血杆菌、2例百日咳,而这些病原体感染后引起的临床症状和MP感染非常类似,使得临床不容易根据临床症状来判断是什么病原体感染,这也是多重病原体核酸检测的技术优势;

4、为什么使用大环内酯类药物治疗那些实际并非MP感染的患儿也能起效?这与该类药物具有免疫调节的功能有关,并不是这些药物真正杀灭或者抑制了MP,而是阿奇霉素调节了患儿的免疫功能,使得非MP感染的患儿临床症状也得到了缓解。

小结 #

研究主要指出了急性感染期单次的MP-IgM抗体血清学检测不能满足临床早期诊断的需求,尤其在MP感染高发的地区,由于MP抗体残留的原因单次MP-IgM检测特异性低,出现较多的假阳性。但若检测急性感染期和恢复期的MP-IgM浓度升高变化(即使两次血清IgM检测间隔缩短到2天也是有效的),MP-IgM才能准确诊断MP感染。

该研究使用了广州华银医学检验中心提供的悬浮微珠液相芯片多重呼吸道病原体检测技术,本文作者在文章末尾对我中心表示了感谢。

华银康呼吸道病原体核酸检测系列产品 #

广州华银医学检验中心研发了基于悬浮微珠液相芯片技术的多重呼吸道病原体核酸检测系列产品,该产品取样方便,咽拭子、肺泡灌洗液和痰液等标本均可送检。技术方面,我们结合了多重PCR特异性扩增技术与Luminex悬浮微珠液相芯片技术平台,可以快速、准确地检出组合内呼吸道感染的常见病原体,可靠性经过了多次验证。近几年,仅在广东地区检测标本量就超过了20万,得到了广大临床的认可,为临床呼吸道感染的早期诊断提供了帮助!在解决精确判断感染病原体种类以便实施精准治疗的临床问题过程中,由于其技术含量较高,在解决临床问题的同时,还能产生优秀的科研成果!

未来,我们会继续致力于不断研发新的分子诊断产品,旨在更好的满足临床的需求,提供保质保量的检验服务!