免疫共沉淀

【技术简介】

（1）技术原理

    免疫共沉淀：免疫共沉淀（Co-immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法，是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。

（2）技术应用

    筛选调控蛋白在基因组上的结合靶点：针对转录因子、DNA/RNA 聚合酶、转录复合物等调控因子蛋白进行特异性的富集，分离纯化与之结合的靶 DNA 片段并测序，分析筛选到准确有效的靶位点、靶基因数据；揭示差异化表观遗传变异的原理：通过对不同表型组织内组蛋白、转录因子蛋白及其他结合蛋白进行染色质免疫共沉淀测序并定量分析靶基因表达调控水平或针对同种组蛋白进行甲基化、磷酸化、泛素化修饰所导致的结合位点变异进行分析，即可准确揭示差异化表观变异原理；研究表观遗传变异疾病：借助染色质免疫共沉淀测序技术结合生物信息分析揭示由蛋白与 DNA 相互作用变异而引起的疾病的原理，明确表观遗传修饰在癌症等表观遗传变异疾病的发生发展过程中的具体作用机制。

【服务内容】

蛋白质抽取与定量；SDS-PAGE分离Co-IP产物；Co-IP实验（以normal lgG作为对照）；western blot或质谱鉴定。

【客户须知及标本要求】

（1）客户须明确检测目的和具体要求，最好能提供1~2篇文献或资料。

（2）客户需提供待检测样品、免疫沉淀用抗体和WB检测用抗体（抗体也可由我们代购）；

（3）待检测样品可以是直接的待检测蛋白样品，也可以是细胞、组织或细菌样品，但需收取蛋白抽提费用。样本收集后应立-80℃保存；

（4）免疫沉淀尽量提供未经冻存的新鲜蛋白样品。